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L¿ANNESSINA A1 NELLA PROGRESSIONE DEL CARCINOMA PANCREATICO: UN NUOVO POTENZIALE BERSAGLIO PER LA DIAGNOSI E LA TERAPIA.

In accordo con le funzioni fisiopatologiche di ANXA1, ci proponiamo di identificare questa proteina come potenziale strumento diagnostico e/o terapeutico nel carcinoma pancreatico. La linea cellulare utilizzata saranno le MIA PaCa-2 dalle quali sono state selezionate due sottopopolazioni clonali quali PGS (vettore vuoto) e ANXA1-KO mediante la tecnologia CRISPR/Cas9 [Belvedere R, et al., 2016]. Saranno inizialmente caratterizzate gli esosomi, mediante analisi proteomica e microsopia elettronica a scansione (SEM) per valutare differenze qualitative e quantitative tra le cellule MIA PaCa-2 wild type, PGS e ANXA1-KO. Studi funzionali saranno svolti mediante saggi di Wound healing e invasione su strato di matrigel allo scopo di indagare il ruolo degli esosomi secreti in presenza ed in assenza di ANXA1 sui processi alla base della metastatizzazione tumorale. Parallelamente sarà indagato il loop ANXA1/miRNAs sulla base di dati ottenuti mediante sequenziamento del miRNoma cellulare a partire dai miRNA estratti da MIA PaCa-2 wild type, PGS e ANXA1-KO. In particolare, saranno testati i miRNA-196a e miRNA-137, rispettivamente down-modulato e sovra-espresso in assenza di ANXA1 per verificare la loro influenza sull’espressione della proteina di interesse e nei processi di migrazione, invasione cellulari. Sulla base delle conoscenze del ruolo tessuto-specifico di ANXA1 nelle diverse forme tumorali [Bizzarro V, et al., 2017; Bizzarro V, et al., 2015] e, in particolare, dell’effetto oncogenico nel carcinoma pancreatico, è nostro intento identificare piccole molecole ad azione inibitoria, capaci di stabilizzare la proteina nella sua forma inattiva, ossia nella forma che conserva il segmento N-terminale all’interno del core proteico [Wang W, et al., 1994].PUBBLICAZIONI1Belvedere, R, Bizzarro V, Forte G, Dal Piaz F, Parente L, Petrella A*. Annexin A1 contributes to pancreatic cancer cell phenotype, behaviour and metastatic potential independently of Formyl Peptide Receptor pathway. Sci. Rep. 2016; 6: 29660. doi: 10.1038/srep29660. IF 2016: 4.259 *corresponding author2 Bizzarro V, Belvedere R, Milone MR, Pucci B, Lombardi R, Bruzzese F, Popolo A, Parente L, Budillon A, Petrella A*. Annexin A1 is involved in the acquisition and maintenance of a stem cell-like/aggressive phenotype in prostate cancer cells with acquired resistance to zoledronic acid. Oncotarget 2015; 6:25076-92. doi: 10.18632/oncotarget.4725. IF 2016: 5.168 *corresponding author3Milite C, Feoli A, Sasaki K, La Pietra V, Balzano AL, Marinelli L, Mai A, Novellino E, Castellano S, Tosco A*, Sbardella G. A novel cell-permeable, selective, and noncompetitive inhibitor of KAT3 histone acetyltransferases from a combined molecular pruning/classical isosterism approach. J Med Chem. 2015; 58(6):2779-98. doi: 10.1021/jm5019687. IF: 6,259 *corresponding author4Dal Piaz F, Ferro P, Vassallo A, Vasaturo M, Forte G, Chini MG, Bifulco G, Tosco A*, De Tommasi N. Identification and mechanism of action analysis of the new PARP-1 inhibitor 2″-hydroxygenkwanol A. Biochim Biophys Acta. 2015; 1850(9):1806-1814. doi: 10.1016/j.bbagen.2015.05.014. IF: 4,702 *corresponding author5Margarucci L, Monti M.C., Tosco A., Esposito R., Zampella A., Sepe V., Mozzicafreddo M., Riccio R., Casapullo A. Theonellasterone, a steroidal metabolite isolated from a Theonella sponge, protects peroxiredoxin-1 from oxidative stress reactions. Chem Commun (Camb) 2015 51: 1591-1593 doi: 10.1039/c4cc09205h. IF: 6,3196Cassiano C, Margarucci L, Esposito R, Riccio R, Tosco A, Casapullo A, Monti MC. In cell scalaradial interactome profiling using a bio-orthogonal clickable probe. Chem Commun (Camb). 2014; 50(45):6043-5. doi: 10.1039/c4cc00989d. IF: 6,3197Fasano R, Gonzalez N, Tosco A, Dal Piaz F, Docimo T, Serrano R, Grillo S, Leone A, Inzé D. Role of Arabidopsis UV RESISTANCE LOCUS 8 in plant growth reduction under osmotic stress and low levels of UV-B. Mol Plant. 2014; 7(5):773-91. doi: 10.1093/mp/ssu002. IF: 8,827