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ACIDI GRASSI POLIINSATURI ED ESPRESSIONE DI GENI COINVOLTI IN PROCESSI MOLECOLARI DELLA NUTRIZIONE PREVENTIVA

Ai fini della valutazione della quota C dei criteri, si evidenziano i seguenti lavori dei componenti del gruppo:- Selective regulation of UGT1A1 and SREBP-1c mRNA expression by Docosahexaenoic, eicosapentaenoic and arachidonic acids. Caputo M, Zirpoli H, Torino G, Tecce MF. J Cell Physiol (2011) 226:187-193. IF 4.218- Induction of alkaline phosphatase activity by exposure of human cell lines to a low frequency (LF) electric field from apparatuses used in clinical therapies. Bisceglia B., Zirpoli H., Caputo M., Chiadini F., Scaglione A., Tecce M.F. Bioelectromagnetics (2011) 32, 113-9. IF 2.021- Selective action of human sera differing in fatty acids and cholesterol content on in vitro gene expression. Zirpoli H, Caputo M, Carraturo A, Torino G, Fazio A, Attya M, Rastrelli L, Tecce MF. J Cell Biochem (2012) 113:815–823. IF 3.062- Triterpenoid constituents from the roots of Paeonia rockii ssp. rockii. Mencherini T, Picerno P, Festa M, Russo P, Capasso A, Aquino R. J Nat Prod (2011) 74:2116-2121 IF 3.285- Xanthohumol induces apoptosis of human glioblastoma cells by increasing reactive oxygen species and activating MAPK pathway. Festa M, Capasso A, D'Acunto CW, Masullo M, Rossi AG, Pizza C, Piacente S. J. Nat. Prod. (2012) 74:2505-2513 IF 3.285- Enhanced brain performance in mice following postnatal stress. Loizzo A, Spampinato SM, Campana G, Vella S, Fortuna A, Costa L, Capasso A, Monteleone P, Renzi P, Loizzo S. Journal of Endocrinology (2012) 215:413-424. IF 4.058-The Expression of the Pro-Apoptotic Gene Air is Inducible in Human Pancreatic Adenocarcinoma Cells. D'Avenia, M, Rosati, A, Belisario, MA, Torino, M, Torino, G, Turco, MC, Pascale, M. J Cell Physiol 226:2207-2212 (2011) IF 4.218-Di recente abbiamo dimostrato che sieri di pazienti, in differente stato di nutrizione e con contenuto variabile in acidi grassi polinsaturi, sono in grado di regolare l'espressione degli mRNA della sterol regulatory element binding protein 1c (SREBP-1c) e della UDP-glucuronosyltransferase 1A1 (UGT1A1), rispettivamente fattore di trascrizione ed enzima implicati nella patogenesi delle patologie cardiovascolari(J Cell Biochem. 2012, 113(3), 815-23). L'effetto è stato osservato dopo avere esposto ai sieri colture di cellule epatiche Hep G2. L'obiettivo della presente proposta è di estendere l'analisi delle precedenti osservazioni da due alla totalità dei geni espressi, utilizzando le tecnologie di “microarray”. Mediante queste tecniche, sono stati ora individuati degli mRNA espressi differenzialmente nelle stesse colture cellulari esposte ai sieri. E' quindi ora da analizzare l'effetto di specifici acidi grassi polinsaturi sull'espressione dei geni selezionati. L'approccio sperimentale utilizzato prevedeva infatti due fasi principali. Nella prima, in gran parte espletata, si è proceduto all'analisi, mediante tecnica di microarray, dei livelli di espressione genica nelle cellule di epatoma umano, trattate nel nostro sistema sperimentale con i singoli sieri umani precedentemente selezionati nel nostro laboratorio. Con l'utilizzo dei “microarray” e con le conseguenti elaborazioni bioinformatiche, sono già stati evidenziati i geni maggiormente modulati, indotti o deindotti, in rapporto alle concentrazioni di colesterolo e di acidi grassi polinsaturi presenti nei sieri dei pazienti. Gli RNA messaggeri risultati differenziali con i “microarray” verranno riconfermati analizzandone l'espressione mediante “real time RT-PCR”. Nella seconda fase di svolgimento del progetto, i geni selezionati nella prima verranno analizzati mediante trattamento, in differenti modalità di esposizione e concentrazione, con differenti acidi grassi polinsaturi e colesterolo. Allo scopo di ottimizzare le condizioni di potenziali trattamenti terapeutici, è anche prevista la valutazione dell'effetto di segnali elettromagnetici di bassa frequenza sulle colture cellulari in studio.